叶酸代谢抑制剂对小鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响

摘要

采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、细胞形态分析法及诱导分化法结合油红O染色法研究叶酸代谢中二氢叶酸还原酶抑制剂甲氨喋呤(methotrexate,MTX)、甲氨苄啶(trimethoprim,TMP)和乙胺嘧啶(pyrimethamine,PTM)对OP9小鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响,探讨叶酸代谢与脂质合成的关系.MTr实验结果显示,在一定浓度范围内,3种叶酸抑制剂均能抑制OP9细胞增殖,并呈现一定的剂量-效应依赖关系.且3种叶酸抑制剂在高浓度时对OP9细胞有毒性作用.倒置显微镜观察和油红O染色检测结果显示,TMP在500～1 000.μmol/L浓度范围内对OP9细胞分化为脂肪细胞具有抑制作用.荧光定量聚合酶链式反应分析表明,TMP会使叶酸代谢途径中二氢叶酸还原酶和亚甲基四氢叶酸脱氢酶的转录水平发生下调,这可能是TMP抑制脂肪细胞诱导分化的原因.