牛肾溶菌酶的分离纯化及部分酶学性质

摘要

将新鲜牛肾匀浆后,经由缓冲液提取,正丁醇除脂,硫酸铵分级沉淀,CM-Sepharose阳离子交换层析,Superdex-200凝胶过滤层析后得到电泳纯的牛肾溶菌酶.结果表明:该酶比活力为15 145.63 U/mg,回收率为29.13％,纯化倍数为231.05;分子质量约12.66 kD,为单亚基酶.最适反应温度为65℃,在65℃以下较稳定;最适pH 9.0,pH值在3.0～9.0范围内稳定性较好;测得最适条件下牛肾溶菌酶对溶壁微球菌的K值为0.399 μg/mL;甲醇、乙醇、异丙醇和硫氰化钾(KSCN)对该酶有激活作用;十二烷基硫酸钠、Pb2+、 Ag+对该酶有明显抑制作用.