应用依赖解旋酶DNA扩增技术检测转基因大豆

摘要

目的:基于依赖解旋酶DNA恒温扩增(helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA)技术,建立快速检测转基因大豆的方法.方法:采用以CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS3种外源基因和内源基因Lectin(大豆凝集素基因)为目的片段设计4对特异引物,建立反应体系,通过HDA方法对内源基因和3种外源基因的检测特异性和灵敏度进行实验,并对结果进行同源性分析.结果:建立了转基因大豆HDA检测法,检测特异性良好,3种外源基因的检出限为0.2％.结论:转基因大豆的HDA检测方法具有普通聚合酶链式反应的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,极适合基层实验室使用,具有广阔的应用前景.