视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50瘤细胞Rb基因突变动态变化研究

摘要

目的:研究SO-Rb50细胞系瘤细胞Rb基因突变的动态变化.方法:1.用Southern blot杂交法分析SO-Rb50细胞系第327代瘤细胞DNA.2.用PCR-SSCP法对SO-Rb50细胞系第415代及第713代瘤细胞的Rb基因27个外显子和1个启动子逐个筛查.3.将SO-Rb50细胞系的第775代克隆出3个细胞株:MC2、MC3及MC4.用PCR-SSCP-HA法对MC2、MC3及MC4第11代细胞和MC3第138代细胞的Rb基因的27个外显子逐个筛查.结果:SO-Rb50细胞系第327代细胞DNA缺失3.5Kb、2.9Kb及1.0Kb的三条带,证明SO-Rb50细胞系瘤细胞Rb基因缺失.第415代瘤细胞Rb基因第23外显子少一条单链;第713代第25外显子发生新的突变.SO-Rb50细胞系第775代的3个克隆株MC2、MC3及MC4的第11代细胞,只有MC4第24外显子突变;而MC3第138代第24外显子突变,提示MC3经多次传代后第24外显子发生新突变.结论:SO-Rb50细胞系在长期培养传代过程中,瘤细胞的Rb基因突变有动态变化.眼科学报2001;17:111～113.