奥美沙坦酯中4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧杂环戊烯-2-酮和4,5-二氯甲基-1,3-二氧杂环戊烯-2-酮的HPLC法测定

摘要

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定奥美沙坦酯中氯代烷基结构类潜在基因毒性杂质[4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧杂环戊烯-2-酮(杂质1)和4,5二氯甲基-1,3-二氧杂环戊烯-2-酮(杂质2)].方法:采用色谱柱为Kromasil Eternity 5-PhenylHexyl柱(4.6 mm ×250 mm,5μm);检测波长:215 nm,流动相A:乙腈:2.04 g·L-1磷酸二氢钾溶液(用1.73 g·L-1磷酸溶液调节pH值至3.4)(20∶80);流动相B:2.04 g·L-1磷酸二氢钾溶液(用1.73 g·L-1磷酸溶液调节pH值至3.4):乙腈(20∶ 80),进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温40℃,进样量10 μL.结果:杂质1和杂质2与主峰分离良好,在浓度为0.106 6～0.710 4μg·mL-1和0.123 5～0.617 4μg·mL-1范围内杂质1和杂质2的线性关系良好(相关系数分别为1.000 0和0.997 1);杂质1和杂质2的平均回收率分别为98.09％和114.85％,RSD(n =9)分别为7％和7％.通过上述色谱条件进行验证,杂质1和杂质2检测限的相对浓度分别可达0.0003％和0.0004％,适用于杂质1和杂质2的测定.同时3批奥美沙坦酯成品中,杂质1和杂质2未检出,表明这两种杂质经过奥美沙坦酯的合成、精制和干燥处理后未传递到成品中.结论:经方法学验证,本法准确性好、灵敏度高,适用于奥美沙坦酯中的杂质1和杂质2的定量控制.