蕲蛇实时荧光定量PCR快速鉴别方法的建立

摘要

为建立中药材蕲蛇的快速鉴别方法,本文基于CO1片段序列特征,采用Oligov 7.0.1软件设计了蕲蛇的特异性引物和TaqMan探针,用以建立TaqMan探针荧光PCR检测蕲蛇成分的方法。结果显示,引物和探针对蕲蛇检测的特异性强,与其他近源性蛇类DNA无非目标扩增,与其他PCR方法相比,所用设备少、污染小,能够在20~40 min得出检测结果,且检测结果50 ng稀释105倍后仍可检测出蕲蛇成分,检测限达到0.5 pg/反应,可见该方法具有准确、快捷、灵敏的特点,可应用于蕲蛇检测,对于保证蕲蛇药材的质量及用药安全具有重要意义。