OppA对副猪格拉菌突破猪呼吸道上皮屏障的影响

摘要

为了探究寡肽结合蛋白OppA在副猪格拉菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障过程中的作用,采用自然转化法构建副猪格拉菌HPS5-SQ的oppA缺失株ΔoppA,并通过测定ΔoppA在不同培养基中的生长曲线、黏附猪气管上皮细胞(swine tracheal epithelial cells,STEC)、穿透猪呼吸道上皮屏障、损伤紧密连接蛋白等能力来判定OppA对GPS定殖和突破猪呼吸道上皮屏障的影响。结果显示:通过PCR和Western blot验证,试验成功构建了ΔoppA,表达的重组OppA具有结合血红素功能;ΔoppA和HPS5-SQ野生株在TSB培养基中生长速度相当,黏附STEC能力没有差异;在加入血红素DMEM中,野生株的生长速度比ΔoppA快,对猪呼吸道上皮屏障破坏和紧密连接蛋白损伤能力比ΔoppA强。结果表明:OppA摄取血红素促进GPS生长,进而加速猪呼吸道上皮屏障损伤。