非洲猪瘟病毒MGF360-9L蛋白多克隆抗体的制备及其对病毒复制的影响

摘要

为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)MGF360-9L蛋白的多克隆抗体并评价其对病毒复制的影响,使用DNAStar 2.1软件预测MGF360-9L的抗原表位,选择并合成了符合抗原要求的MGF360-9L C端多肽CKNLSIAHKHYINDGFND,制备MGF360-9L家兔源多克隆抗体。随后采用实时荧光定量PCR方法、血细胞吸附试验和Western-blot方法等评价MGF360-9L的多克隆抗体对病毒复制的影响。结果显示,不同稀释倍数的MGF360-9L多克隆抗体在不同感染时间下均可显著降低病毒的拷贝数、效价以及D1133L和B646L(p72)两种病毒蛋白的表达,并且抗体稀释度越低,降低病毒拷贝数、效价以及病毒蛋白表达的作用越强。此外,不同稀释倍数的MGF360-9L多克隆抗体均可抑制感染重组病毒ASFV-GFP的猪肺泡巨噬细胞中绿色荧光蛋白的产生。结果表明,与阴性家兔血清相比,不同稀释倍数的MGF360-9L抗体均可显著抑制ASFV的复制。本研究为ASFV靶向药物和疫苗的研发提供了参考依据。