丹参酮ⅡA干预间充质干细胞对LPS诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用

摘要

目的探索丹参酮ⅡA(TⅡA)改良间充质干细胞(MSC),从而增加MSC对神经炎症的抑制作用。方法首先比较MSC和TⅡA-MSC培养上清的外泌体,通过电镜及流式检测粒径和浓度。然后采用Transwell共培养系统以1∶1的比例接种N9细胞和MSC,分为对照组、LPS(1μg/mL)组、LPS+MSC(1μg/mL LPS+MSC)组、LPS+TⅡA-MSC(1μg/mL LPS+TⅡA-MSC)组、LPS+TⅡA-MSC+TREM2 siRNA(1μg/mL LPS+TⅡA-MSC+TREM2 siRNA)组,用Western blot检测IL-1β、IL-6和TNF-α的变化。结果TⅡA-MSC的外泌体含量高于MSC(P=0.038)。与LPS组相比,LPS+MSC组IL-6(P=0.014)和TNF-α(P=0.044)表达下调;LPS+TⅡA-MSC组IL-1β(P=0.002)、IL-6(P<0.001)和TNF-α(P=0.003)表达下调,而TⅡA-MSC对炎症因子的下调作用更显着。与LPS+MSC组相比,LPS+TⅡA-MSC组IL-6显着降低(P<0.001)。而使用TREM2 siRNA沉默MSC的TREM2基因后,TⅡA-MSC降低N9细胞炎症因子的能力减弱,与LPS+TⅡA-MSC组相比,TREM2 siRNA可显着减弱IL-6(P=0.005)和TNF-α(P=0.033)的降低。结论TⅡA-MSC抑制LPS诱导的N9细胞炎症反应的优越性与增加外泌体分泌,调控TREM2信号通路有关。