丹参酮ⅡA诱导人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化、提高预分化细胞归巢能力的研究

摘要

目的评估丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞(hPDMSCs)向心肌细胞分化及预分化细胞归巢能力的影响,并探讨其相关机制。方法应用组织块法分离培养hPDMSCs。取第3~6代对数生长期的hPDMSCs,分别用丹参酮ⅡA或丹参酮ⅡA+β-catenin激动剂WAY-262611处理,同时设置不加药的对照组,20 d终止实验。用MTS法评估细胞增殖情况,划痕实验分析预分化细胞向损伤区域迁移情况,Western blotting检测心肌特异性蛋白(GATA-4、ANP、α-SCA、cTnI)、Wnt/β-catenin通路相关蛋白(APC、Gsk-3β、β-catenin)以及与归巢相关的趋化因子(CXCR-4、CCR-2)的表达情况。结果应用组织块法成功分离培养出hPDMSCs;与对照组相比,经丹参酮ⅡA干预的hPDMSCs增殖速率明显减慢,心肌特异性蛋白GATA-4、ANP、α-SCA、cTnI的表达明显增加(P<0.05),向损伤区迁移的能力明显增强,且在这个过程中,APC、Gsk-3β、CXCR-4、CCR-2的表达明显增多(P<0.05),β-catenin的表达明显减少(P<0.05)。但当丹参酮ⅡA与β-catenin激动剂WAY-262611联合干预hPDMSCs后,丹参酮ⅡA抑制细胞增殖、促进心肌特异性蛋白GATA-4、ANP、α-SCA、cTnI的表达、提高细胞向损伤区迁移的能力明显降低,且CXCR-4、CCR-2的表达也明显减少(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA能够通过调控Wnt/β-catenin通路诱导hPDMSCs向心肌细胞分化、提高预分化细胞向损伤区的归巢能力。