青光安颗粒含药血清对TGF-β_1诱导的人Tenon's囊成纤维细胞自噬的影响

摘要

目的:通过体外培养人Tenon’s囊成纤维细胞(human tenon’s fibroblasts, HTFs)并经TGF-β_1诱导,探讨青光安颗粒含药血清对青光眼滤过性手术后细胞模型自噬的影响。方法:(1)取人的Tenon’s囊组织培养HTFs并鉴定,加入TGF-β_1诱导分化为肌成纤维细胞,构建GFS术后细胞模型。(2)细胞模型中加入最适浓度的青光安含药血清,设立正常组(空白组)、TGF-β_1组(模型组)、TGF-β_1+含药血清组(治疗组)、TGF-β_1+雷帕霉素组(阳性对照组),用Cyto-ID自噬检测试剂盒在荧光显微镜下及Cytation5细胞成像多功能仪器检测,观察核周围和细胞质的自噬小体及自噬溶酶体成分,以自噬阳性细胞数所占百分比表示HTFs的自噬水平,同时检测自噬阳性细胞的平均荧光强度。结果:治疗组自噬阳性细胞百分比明显高于空白组与模型组,差异有统计学意义(P<0.01);且治疗组自噬程度呈含药血清干预时间依赖型即正相关;其自噬阳性细胞平均荧光强度呈含药血清干预时间依赖型即正相关。结论:青光安颗粒含药血清能增强青光眼滤过性手术后细胞模型的自噬表达。