下调HOXA5表达对胶质瘤细胞增殖能力和细胞周期的影响

摘要

目的探讨下调同源异型盒基因A5(HOXA5)表达对胶质瘤细胞增殖能力和细胞周期的影响。方法应用生信分析方法,计算机检索CGGA数据库,下载m RNAseq-693和m RNAseq-325芯片数据,获取低级别胶质瘤(WHO分级Ⅱ级)和高级别胶质瘤(WHO分级Ⅲ、Ⅳ级)HOXA5 m RNA表达及病人生存信息;以HOXA5表达水平的平均值为界限,将高级别胶质瘤分为低表达组和高表达组。体外培养人胶质瘤细胞株U87和U251,使用Lipofectamine 2000法将HOXA5 si RNAs和阴性对照si RNAs分别转染U87和U251细胞;CCK-8和平板克隆形成实验评估胶质瘤细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期;免疫印迹法检测蛋白表达水平。结果生信分析结果显示:高级别胶质瘤HOXA5表达水平均显著高于低级别胶质瘤(P<0.01);HOXA5高表达组高级别胶质瘤病人中位生存时间较低表达组明显缩短(P<0.01)。体外细胞实验结果:敲低HOXA5表达,U87和U251细胞的增殖率和克隆集落数量显著降低(P<0.01),U87和U251细胞G0/G1期细胞百分比显著增高(P<0.01),U87和U251细胞CDK4蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论胶质瘤HOXA5呈高表达,病理级别越高,表达水平越高,病人生存预后越差。敲低HOXA5表达,明显降低CDK4表达,使细胞周期停滞在G0期,明显抑制胶质瘤细胞的增殖。