垂体肿瘤转化基因1表达下调对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期和细胞侵袭能力的影响及其分子机制

摘要

目的利用垂体肿瘤转化基因1（PTTG1）siRNA下调骨肉瘤细胞中PTTGl的表达,研究其表达下调对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期和细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的分子机制。方法采用Western blot检测3株骨肉瘤细胞（MG-63、SaOS-2和U2OS）和l株成骨细胞hFOBl.19中PTTG1蛋白的表达。用对照和PTTG1 siRNA转染骨肉瘤U2OS细胞,采用Western blot检测转染前后PTTG1蛋白的表达水平,分别利用细胞增殖与活性检测试剂盒、流式细胞术和Boyden小室检测PTTG1 siRNA对骨肉瘤U2OS细胞增殖、细胞周期和侵袭能力的影响,采用Western blot检测不同处理的U2OS细胞中Akt的活化状态及其下游靶基因的表达。结果3株骨肉瘤细胞MG-63、SaOS-2和U2OS中PTTG1蛋白表达均高于成骨细胞hFOB1.19,其中U2OS中表达较高。PTTG1 siRNA能显著下调骨肉瘤U2OS细胞中PTTG1蛋白的表达,抑制U2OS细胞的增殖、改变细胞周期分布并降低侵袭能力。此外,PTTG1表达下调能抑制骨肉瘤细胞中p-Akt（S473和T308）、基质金属蛋白酶（MMP-2）和MMP-9的表达,提高p21和上皮性钙黏蛋白（E-cadherin）的表达。结论PTTG1可能与骨肉瘤的发生发展关系密切,有望为骨肉瘤分子靶向治疗提供新策略。