间接共培养环境下脂肪干细胞诱导分化的研究

摘要

目的肌腱病的治疗是临床的难点,脂肪干细胞(ADSCs)具有多向分化潜能,为肌腱病的治疗提供了新思路。此课题在体外构建ADSCs与肌腱细胞的间接共培养模式以探索其机制,为其临床应用提供参考。方法分别采集培养兔肌腱细胞和ADSCs及富血小板血浆(PRP)。选用孔径为0.4μm的共培养嵌盒和6孔板来构建间接共培养模式。分别将P3代肌腱细胞、ADSCs接种于内、外室,另外设置PRP干预组。分别在第3,7,14天时,收集各组内、外室细胞并进行观察及检测,分析间接共培养环境对ADSCs诱导分化与胞外基质表达产生的影响。结果间接共培养14 d,免疫组化结果显示单纯干细胞培养组ADSCs的Ⅰ型胶原与腱调蛋白(TNMD)的表达程度显著高于阴性的干细胞对照组,低于阳性肌腱细胞对照组,而PRP干预组的表达优于单纯干细胞实验组。结论间接共培养的环境下,可以诱导ADSCs上调Ⅰ型胶原和腱调蛋白的表达。PRP的干预对诱导ADSCs细胞外基质的分泌有促进作用。