丹酚酸B对转化生长因子β_1诱导人肺成纤维细胞增殖和分化的影响

摘要

目的:观察丹酚酸B(Sal B)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺成纤维细胞增殖及分化的影响。方法:将人胚肺成纤维细胞(MRC-5)随机分为6组:对照组(未加入TGF-β1或Sal B);1μmol/L Sal B组;10μmol/L Sal B组;10ng/mL TGF-β1组;TGF-β1(10ng/mL)+1μmol/L Sal B组;TGF-β1(10ng/mL)+10μmol/L Sal B组。采用MTT法观察各组细胞增殖情况;RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞α-SMA mRNA和蛋白的表达情况;免疫荧光方法检测细胞内纤维形肌动蛋白(Factin,Fibrous Actin)重组及观察细胞形态变化。结果:与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平均明显增加,细胞形态发生明显改变,胞内可见大量F-actin聚合形成的应力纤维(stress fiber)(P0.05);与单纯TGF-β1组比较,TGF-β1+Sal B两组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均下降,发生形态改变的细胞减少,胞内F-actin聚合形成的stress fibers减少(P<0.05),且10μmol/L Sal B对TGF-β1抑制效应优于1μmol/L Sal B,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Sal B体外能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞增殖和向肌纤维母细胞分化。