抗乙肝表面抗原单链抗体的基因克隆与序列分析

摘要

目的　为乙型肝炎病毒基因工程双特性抗体的研制奠定基础。方法　提取抗乙型肝炎病毒杂交瘤细胞总RNA ,利用鼠源性抗体可变区通用引物 ,经逆转录PCR扩增轻链可变区和重链可变区基因 ,用连接肽 (Gly4Ser) 3连接轻、重链可变区基因 ,构建单链抗体基因 ,并克隆pGEM -TEasy质粒 ,进行核苷酸序列分析。结果　分别得到了 4 14bp的轻链可变区基因片段和 3 93bp的重链可变区基因片段 ,序列分析表明轻链可变区属于小鼠kappa链第XX家族 ,重链可变区属于小鼠Ig链第IX家族。结论　克隆到序列正确的抗乙型肝炎病毒表面抗原单链抗体基因。