内脏高敏感小鼠肠道树突状细胞异常活化与PDIA3/STAT3的相关性研究

摘要

背景内脏高敏感的发生与肠系膜淋巴结树突状细胞(mesentericlymph node dendritic cells,MLNDC)的异常活化相关;蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfideisomerase A3,PDIA3)可以调节信号转导与转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)通路的活性.我们假设,在MLNDC中,PDIA3可以抑制STAT3通路,激活MLNDC,并最终引起内脏高敏感.目的初步探讨PDIA3/STAT3在内脏高敏感小鼠肠道树突状细胞异常免疫活化中的可能作用方法40只C57BL/6小鼠随机分成对照组(20只)和模型组(20只),采用束缚应激建立小鼠肠易激综合征内脏高敏感模型,用腹部撤回反射评估小鼠肠道敏感性,磁珠分选技术分离两组小鼠MLNDC,流式检测分选纯度以及比较两组MLNDC表面主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex II,MHC-II)类分子的表达情况,蛋白印记技术和免疫荧光技术比较两组MLNDC中PDIA3和磷酸化-信号转导与转录激活因子3(phosphorylated signal transduction andactivator of transcription 3,P-STAT3)的表达及分布情况,混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)比较两组DC对初始T淋巴细胞的激活能力.结果模型组小鼠结肠扩张容量阈值明显低于对照组[(0.53mL±0.07 mL)vs(0.85 mL±0.12 mL),t=-10.845,P=0.000];流式检测磁珠分选所得的小鼠树突状细胞特异性抗原CD11c阳性MLNDC为86.61%±7.02%;模型组MLNDC表面MHC-Ⅱ类分子表达显著高于对照组[(73.08%±2.64%)vs(53.20%±4.50%),t=-7.617,P=0.000];与对照组相比,模型组小鼠MLNDC表达PDIA3明显升高[(0.77±0.04)vs(0.42±0.03),t=11.086,P=0.000],同时P-STAT3的表达明显下降[(0.73±0.03)vs(1.24±0.18),t=-4.737,P=0.038)],MLR中刺激初始T淋巴细胞增殖的能力明显增强[(34.24%±2.95%)vs(17.22%±3.47%),t=6.472,P=0.003].结论内脏高敏感小鼠MLNDC的异常免疫活化或许和PDIA3/STAT3有关.