人骨髓间充质干细胞玻璃化冷冻复苏后的生物学活性

摘要

目的探讨人骨髓间充质干细胞(BMSCs)玻璃化冷冻复苏后细胞的存活率和诱导分化能力。方法体外分离纯化人BMSCs,流式细胞仪检测其纯度。应用玻璃化冷冻方法进行冷冻保存,复苏后台盼蓝染色鉴定存活率。在DMEM/F12培养的BMSCs中加体积分数0.10的胎牛血清和10μg/L重组人碱性成纤维细胞生长因子预诱导2d,再加0.1μmol/L全反式维甲酸和10μg/L胶质细胞系源性神经营养因子进行正式诱导3d,免疫荧光染色检测Nestin、微管相关蛋白(MAP2)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、胶质纤维蛋白(GFAP)的表达。结果 BMSCs强表达CD44和CD90,不表达CD34和CD45。玻璃化冷冻解冻后细胞存活率>95%。经诱导后,BMSCs强阳性表达MBP和GFAP,弱阳性表达Nestin和MAP2。结论玻璃化冷冻复苏后的人BMSCs存活率高并能成功诱导为神经胶质细胞。