UCH-L1基因敲除小鼠的饲养、繁殖及鉴定

摘要

目的饲养、繁殖和鉴定泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)基因敲除小鼠,获得UCH-L1基因敲除纯合子小鼠,为深入研究UCH-L1的生物学功能奠定基础。方法从美国购进的UCH-L1基因敲除小鼠经适应性饲养1周后,将1只雌性杂合子和1只雄性杂合子小鼠合笼饲养并繁殖,剪取子代小鼠尾尖部0.5 cm组织,提取基因组DNA,PCR方法鉴定其基因型。雄性杂合子与雌性杂合子交配生产后代中,野生型和UCH-L1基因敲除纯合子小鼠用于后续的生物学功能研究;杂合子小鼠用于繁殖。观察UCH-L1基因敲除纯合子小鼠的表型变化,并利用免疫印迹法验证UCH-L1基因敲除的效果。结果小鼠成功繁殖后,利用杂合子交配共生产370只小鼠,其中UCH-L1+/+占34.1%、UCH-L1+/-占50.5%、UCH-L1-/-占15.4%,成功获得UCH-L1基因敲除纯合子小鼠,并建立了饲养、繁殖和鉴定方法。结论采用雌性和雄性UCH-L1基因敲除杂合子小鼠交配,不仅可以获得UCH-L1基因敲除纯合子小鼠,而且有利于长期饲养与繁殖。