细粒棘球绦虫重组pCD-Eg95质粒构建及鉴定

摘要

目的:构建并鉴定细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)重组pCD-Eg95质粒。方法:从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后抽提总RNA,采用RT-PCR方法扩增Eg95编码基因,将该基因定向克隆到真核表达载体pCDNA3.1中构建pCD-Eg95重组质粒;电穿孔转化大肠杆菌BL21(DE3)株,抽提质粒进行酶切及PCR鉴定。结果:电泳及测序证实471bpEg95基因克隆成功。经酶切及PCR证实重组质粒pCD-Eg95成功转入BL21(DE3)。结论:成功构建了Eg重组pCD-Eg95质粒。