大鼠脑源性神经营养因子基因克隆及其真核表达载体的构建

摘要

目的克隆大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因的表达序列,构建大鼠BDNF基因真核表达载体。方法以RT-PCR从大鼠脑组织总RNA中扩增BDNF cDNA,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中构建重组质粒pcDNA3-BN,以限制酶酶切鉴定和DNA序列分析鉴定重组质粒。结果RT-PCR产物为783bp特异片段,重组质粒酶切后产生783bp和5.2kb的片段,DNA测序证实783bp片段的碱基序列与大鼠BDNF基因序列完全一致。结论成功克隆大鼠BDNF基因表达序列并构建了BDNF基因真核表达载体pcDNA3-BN。