人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统的构建及序列分析

摘要

目的构建人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统,为毒理学、遗传药理学的研究等提供材料。方法用RT-PCR技术从人肝脏组织总RNA中分离扩增人谷胱甘肽硫转移酶A1基因的cDNA序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果人谷胱甘肽硫转移酶A1被正确地克隆到真核表达载体pcDNA3中,测序结果同Genbank序列比较,在152位点T→C,氨基酸由Met→Thr。结论经酶切鉴定和PCR扩增,证实人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统构建成功。