人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统序列分析

摘要

目的　对人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建及序列分析。方法　采用RT -PCR方法将肺组织中提取总RNA扩增人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列 ,将其插入到真核表达载体 pcDNA3 1多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果　人谷胱甘肽硫转移酶M1克隆到真核表达质粒 pcDNA3 1中 ,测序结果同GenbankGSTM 1(GI:1836 6 8)cDNA序列相比较 ,在 6 19位点C→A ,氨基酸由Pro→Thr;在 5 19位点C→G ,编码的氨基酸仍为lys;在 5 2 8位点C→T ,编码的氨基波仍为Asp ,同源性为 99% ,基因登陆号为AY5 32 92 6。结论　人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建 ,为进一步进行真核细胞和动物的解毒机制研究 。