外源性p16基因对食管癌患者癌细胞系的生长抑制作用

摘要

目的观察外源性p16基因质粒导入食管癌患者食管鳞癌细胞系Ec109后的表达及其对Ec109细胞增殖生长状况的影响。方法根据转染质粒的不同或是否行p16 cDNA质粒转染分为三组，每组分别为5个样本。PcDNA3-P16转染组（P16转染组）：采用脂质体(Lipofectamine)为载体，将PcDNA3-P16表达质粒导入Ec109细胞;空载体转染组：用PcDNA3-neo空载体以上述相同方法转染，作空白对照；未转染组：未用PcDNA3-P16质粒转染，作阴性对照。应用Northern斑点杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测转化细胞的P16蛋白变化;流式细胞仪分析细胞周期变化，DNA片段化电泳检测细胞凋亡。结果 P16转染组外源性p16基因在Ec109细胞中表达后，细胞生长速度减慢，克隆形成能力下降，瞬时表达时有细胞凋亡发生，稳定表达后细胞存在G1期阻滞；空载体转染组和未转染组均未观察到以上结果。结论脂质体介导的外源性p16基因转染对Ec109细胞有生长抑制作用，p16基因瞬时表达可诱导细胞凋亡。