腺病毒介导钙离子ATP酶基因在骨髓间充质干细胞的表达

摘要

目的 :以腺病毒 (Ad CMV)介导钙离子ATP酶基因 (sarcoplasmicreticulumCa2 + ATPase,SERCa2a)转染骨髓间充质干细胞 (Bonemarrowmsenchymalstemcells,BMSCs) ,测定表达产物 ,为心力衰竭的细胞移植和基因治疗提供实验基础。方法 :体外培养大鼠骨髓间充质干细胞 ,用已构建好的Ad5 CMV SERCa2a真核载体进行转染。通过流式细胞仪检测转染效率。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、West ern杂交等方法检测SERCa2amRNA和蛋白质的表达。结果 :Ad5 CMV SERCa2a对BMC的转染率为80 %左右 ,没有明显的细胞毒性反应。RT PCR检测到SERCa2a ,Western杂交确定SERCa2a蛋白表达。结论 :腺病毒载体可有效地介导SERCa2a基因转染BMC ,并表达SERCa2a蛋白 。