利用正交设计优化牡丹SRAP-PCR反应体系

摘要

利用正交设计L16(45)对牡丹SRAP-PCR反应体系的五因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)在四个水平上进行优化试验,得出如下结论:各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小依次为:Taq酶,引物,dNTPs,Mg2+,模板DNA;筛选出各反应因素的最佳水平,建立牡丹SRAP-PCR反应的最佳体系(25μL)为:Taq酶0.5U,Mg2+2.0mmol/L,模板DNA50ng,dNTP0.2mmol/L,引物0.30μmol/L。这一优化系统的建立为今后利用SRAP标记技术对牡丹进行相关研究提供了帮助。