逆转录多聚合酶链反应检测排斥反应期移植肠基因的转录

摘要

排斥反应仍然是阻碍小肠移植成功的主要障碍 ,其机理、诊断及治疗均有待进一步研究 .目前建立逆转录多聚合酶链反应 (RT PCR)方法 ,观察排斥反应期移植肠IL 2、IFN γ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录变化 .取大鼠移植肠标本提取总RNA ,并进行RT PCR检测IL 2、IFN γ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录 ,PCR产物以内参基因 β actin为内对照 ,应用SX 10 0生物影像分析系统进行半定量分析 .结果显示RT PCR无非特异性扩增 ,β actin和各目的基因扩增的模板投入量与反应循环数均在指数增长范围内 ,且扩增效率相同 ,所以各目的基因mRNA的定量可用 β actinmRNA作为内标来校正 .排斥反应期移植肠IL 2、IFN γ、穿孔素、粒细胞酶B的mRNA转录显著升高 .结果表明RT PCR检测移植肠IL 2、IFN γ、穿孔素。