靶向DC-SIGN的Le(x)-OVA抗原的制备

摘要

目的制备用于靶向DC-SIGN受体的Le(x)寡糖介导的靶向抗原。方法利用Su lfo-SMCC异源双功能交联试剂交联链霉亲和素(streptavid in,SA)和模式抗原卵白蛋白(ovalbum in,OVA),再利用SA与生物素高亲和力结合的特性,将SA-OVA复合物与生物素修饰的Le(x)寡糖反应,由此获得由Le(x)寡糖介导的靶向抗原Le(x)-OVA复合物。结果应用SDS-PAGE蛋白质电泳和W estern免疫印迹方法证实SA与OVA蛋白成功交联,ELISA方法证实SA-OVA复合物中的SA仍具有与生物素反应的功能,根据SA-OVA复合物与生物素修饰的Le(x)寡糖饱和反应的比例,获得所需要的靶向抗原Le(x)-OVA复合物。结论获得Le(x)寡糖介导的靶向抗原Le(x)-OVA复合物,为进一步研究经由DC-SIGN靶向后的抗原特异性免疫应答奠定了基础。