无花果沙雷氏菌CH0203壳聚糖酶的纯化及生化性质研究

摘要

目的:得到纯化的无花果沙雷氏菌CH02503的壳聚糖酶,并研究其生化性质.方法:将发酵粗酶液先后通过硫酸铵分级沉淀,superdex75凝胶柱和羧甲基纤维素离子交换柱层析,壳聚糖酶得到纯化.结果:经测定,该酶为内切酶,其相对分子质量为29kDa,等电点9.4,在45℃和pH 4.0～7.5之间稳定,最适温度是45℃,最适pH3.6,Mn2+、Co2+能够激活,pb2+、Cu2+、Ni+、Cr3+能够抑制该酶的活性,该酶最适底物是脱乙酰度85%的壳聚糖,对脱乙酰度低于45%的壳聚糖不能作用,对羧甲基甲壳素和羧甲基纤维素不能作用,以完全脱乙酰的壳聚糖为底物时,最终水解产物是单糖、二糖、三糖,反应的米氏常数为0.44mg/ml.