HSV-1感染细胞中HTRP基因的克隆及表达纯化

摘要

在对单纯疱疹病毒 1型 (HSV - 1)感染KMB - 17细胞后的早期基因反应的研究中 ,从HSV - 1感染后细胞特异性cDNA文库中筛选出一个 1381bp基因—HTRP ,基因测序分析表明为与HSV - 1感染相关基因 (GenBank登录号 :AF45 0 482 ) ,含有完整的ORF框架 ,cds全长 92 4bp ,编码 30 8个氨基酸。构建了 pGEX -HTRP表达质粒 ,在大肠杆菌BL2 1中获得了较高的表达 ,采用GlutathioneSepharose4B进行亲和纯化后获得较高纯度的HTRP蛋白。用该蛋白免疫小鼠后制备的特异抗血清 ,在蛋白印迹实验中表现出抗体的特异性。