霍乱弧菌NhaA基因的扩增、克隆和初步鉴定

摘要

目的　体外扩增、克隆霍乱弧菌 O1群和 O139群 1149bp的 Nha A基因片段。方法　采用 PCR方法扩增 Nha A基因 ,经限制性内切酶 Bam H I和 Eco RI酶切后用低熔点琼脂糖法回收纯化 ,插入 pc DNA3载体的多克隆位点 ,构建重组体 ,转化大肠杆菌 ,并对克隆基因进行酶切鉴定。结果　分别从霍乱弧菌 O1群和 O139群扩增出 1149bp的 Nha A基因片段 ,所构建的重组体经酶切分析和预期结果一致。结论　成功扩增并克隆我国散发霍乱 O1群和 O139群 Nha A基因 ,为研究霍乱流行规律和基因疫苗提供了重要的实验依据。