三株霍乱弧菌基因组文库的构建与鉴定及含ctxΦ阳性克隆子的筛选

摘要

为了更进一步了解中国新疆分离的VC O139菌株的分子生物学特征及其来源,该研究拟选用可以插入大片段DNA的粘粒SuperCOS1为载体,构建新疆O139群菌株XJ93006、国际O139群标准株MO45的基因组文库;选用pNEB193质粒为载体,尝试插入较大的DNA片段,建立新疆E1 Tor型霍乱弧菌菌株89079的基因组文库,并对三个菌株的基因组文库的质量和实用性作了评价;从三个基因组文库中筛选出霍乱弧菌的主要毒力基因簇ctxΦ的阳性克隆子,并对其进行分析;同时克隆了新疆El Tor霍乱弧菌的肠毒素基因(ctxAB)及其启动子序列.该研究为研究中国VC O139的来源及构建霍乱的疫苗奠定坚实的基础.

目录

论文摘要

前言

第一部分三株霍乱弧菌基因组文库的构建与鉴定

前言

第一节0139群霍乱弧菌基因组文库的构建与鉴定

材料与方法

结果

第二节新疆E1Tor霍乱弧菌89079菌株基因组文库的构建与鉴定

1.材料与方法

结果

小结

第二部分基因组文库中含ctxФ阳性克隆子的筛选

前言

材料与方法

结果

小结

第三部分pNEBctxФ79限制性内切酶物理图谱的构建

前言

材料与方法

结果

小结

第四部分霍乱毒素ctxAB基因(含启动子序列)的克隆

前言

材料与方法

结果

小结

讨论

结论

参考文献

O139群霍乱弧菌来源的研究进展

ABBREVIATION

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致谢

博士生期间发表主要论文