重组腺相关病毒介导的RNAi抑制血管生长素表达对肺鳞癌细胞成瘤能力的影响

摘要

目的:通过腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制肺鳞癌细胞SK-MES-1的血管生长素(angiogenin,ANG)表达,观察其对癌细胞生长及成瘤能力的影响。方法:构建H1启动子驱动的表达针对ANG的小干扰RNA(siRNA)重组腺相关病毒AAV-shANG,转染SK-MES-1细胞;同时以正常SK-MES-1细胞以及转染AAV-Null的SK-MES-1细胞作为对照。培养72 h后,蛋白质印迹法检测3组细胞ANG蛋白表达变化,并检测细胞周期。将以上3组细胞移植胸腺缺陷小鼠观察其生长和成瘤能力的变化,并进行微血管密度计数。结果:成功构建重组腺相关病毒AAV-shANG,转染SK-MES-1细胞后ANG蛋白表达水平为两对照组细胞的20％,细胞增殖指数未见差异。AAV- shANG转染细胞在胸腺缺陷小鼠中的成瘤体积、瘤质量和微血管密度均较两对照组细胞显著下降(P<0．05)。结论:腺相关病毒介导的shANG表达能有效抑制SK-MES-1细胞中ANG蛋白表达,抑制其成瘤能力,对肺鳞癌的治疗具有重要的意义。