通关藤苷H抑制低分化鼻咽癌细胞增殖及转移的作用机制研究

摘要

[目的]研究通关藤苷H对低分化鼻咽癌(NPC)细胞增殖和转移抑制作用及其机制。[方法]以人低分化NPC细胞株CNE-2为病理模型,采用细胞计数试剂CCK-8检测通关藤苷H对细胞存活率的影响。摸索适宜的药效浓度范围,流式细胞法检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测磷酸化蛋白激酶B、磷酸化糖原合成酶激酶-3β、周期蛋白D1、上皮性钙黏附蛋白、神经性钙黏附蛋白和波形蛋白的含量,酶联免疫吸附(Elisa)法检测两种基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)细胞培养液中的浓度,Transwell检测CNE-2的转移侵袭能力。[结果]CCK-8结果显示,通关藤苷H可显著降低CNE-2细胞的存活率(P<0.05);流式细胞法结果表明,通关藤苷H促进CNE-2细胞的凋亡(P<0.05);Transwell检测结果显示CNE-2转移侵袭能力随通关藤苷H浓度增加而逐渐降低,Western blot结果显示随着通关藤苷H浓度的增加,Akt的磷酸化程度逐渐减少,GSK-3β的磷酸化修饰则逐渐增加,进而上调周期蛋白D1的表达;通关藤苷H可随浓度增加逐渐上调上皮性钙黏附蛋白和下调神经性钙黏附蛋白、波形蛋白的含量,并抑制MMP-2和MMP-9的分泌(P<0.05)。[结论]通关藤苷H可通过影响磷酸化蛋白激酶B/磷酸化糖原合成酶激酶-3β/周期蛋白D1通路,并上调上皮性钙黏附蛋白和下调神经性钙黏附蛋白、波形蛋白的含量,减少MMP-2和MMP-9的分泌,抑制CNE-2细胞的增殖、侵袭和转移。