钾依赖钠钙交换蛋白6对人胚胎肾细胞钙离子浓度的影响

摘要

目的观察钾依赖钠钙交换蛋白6(NCKX6)对人胚胎肾细胞钙离子浓度的影响。方法RT-PCR克隆NCKX6基因全长,将NCKX6基因构建到真核表达载体pEGFP-C3,转染HEK293细胞,荧光分光光度仪观察细胞内钙离子浓度变化。结果重组真核表达载体pEGFP-C3-NCKX6构建成功,荧光分光光度仪观察到NCKX6过表达后HEK293细胞内游离Ca^(2+)浓度明显高于正常对照组,并有显著统计学差异。当细胞外145 mmol/L的Na+完全由145 mmol/L的Li+置换后,NCKX6过表达的HEK293细胞内Ca^(2+)浓度出现明显升高。结论NCKX6的双向转运模式主要以逆向转运模式即将细胞外Ca^(2+)转运入细胞内为主。