血管内皮细胞通过Notch信号通路对胶质瘤细胞侵袭性生长的影响

摘要

目的探讨血管内皮细胞对胶质瘤细胞侵袭力的影响及其与Notch信号通路之间的关系。方法在体外采用Transwell共培养系统将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和U87胶质瘤细胞进行间接共培养;抑制剂DAPT(N-[N-(3,5-di-fl uorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butylester)抑制Notch信号通路;Transwell小室快速检测各组U87细胞的侵袭力;Real-time PCR检测各组U87细胞中Notch1、Notch2、Hes1、Delta样配体4(Dll4)、Cathepsins B、MMP-9、MMP-2 m RNA的表达情况;Western blot检测各组U87细胞中MMP-9、MMP-2蛋白、Cathepsins B的表达情况。结果共培养组较单纯组U87细胞生长旺盛,DAPT处理后生长受抑制;共培养组穿过Matrigel膜的U87细胞数目明显多于单纯组,DAPT处理组较共培养组穿膜细胞数目减少。共培养组U87细胞的Notch1、Notch2、Hes1、Dll4、Cathepsins B、MMP-9 m RNA的表达及各组U87胶质瘤细胞中MMP-9、Cathepsins B蛋白的表达水平明显升高,DAPT处理组较共培养组相关的m RNA和蛋白水平降低。结论血管内皮细胞可以通过Notch信号通路增强U87胶质瘤细胞的侵袭力,DAPT抑制Notch信号通路可以降低血管内皮细胞对U87胶质瘤细胞侵袭力的增强效果,Notch信号通路在血管内皮细胞对U87胶质瘤细胞的侵袭力的增强过程中起重要的调控作用。