高白鲑肌肉蛋白质组双向电泳技术体系的优化

摘要

为建立高白鲑肌肉蛋白质双向电泳分析方法,通过固相pH梯度胶条等电聚焦和SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,分别考察了蛋白质样品制备方法、上样量、IPG胶条pH值、等电聚焦程序、助凝剂剂量、SDS-PAGE凝胶浓度及染色方法等影响的因素。结果显示,采用丙酮沉淀法制备蛋白质样品,上样量90μg,IPG胶条pH值5~8,一向胶聚焦时间400V16h+1000V2h,平衡时间15min,0.05mL过硫酸铵及2μLTEMED,10%(体积分数)二向分离胶和硝酸银染色时,获得蛋白质分离效果好,分辨率高及横纹少的高白鲑肌肉蛋白质二维电泳图谱,为高白鲑肌肉蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。