bFGF cDNA重组逆转录病毒表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

摘要

目的　建立逆转录病毒介导的人bFGF体外表达体系。方法　应用DNA重组技术 ,将人bFGFcDNA片段重组到逆转录病毒质粒pLXSN中 ,经PA3 17细胞包装后 ,产生的重组逆转录病毒感染COS 7细胞 ,用RT PCR和WesternBlotting检测bFGFmRNA和蛋白表达。结果　重组pLXSN bFGF质粒 ,经酶切鉴定正确。重组逆转录病毒pLXSN bFGF滴度可达 2 3× 10 4CFU/ml,感染COS 7后能稳定表达。结论　逆转录病毒能介导人bFGF在哺乳动物细胞中的稳定表达 。