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山羊卵巢无腔卵泡卵母细胞的体外生长

         

摘要

山羊卵巢无腔卵泡卵母细胞在以DMEM为基础,添加HEPES(20mmol/L)、FCS(10%)、FSH(40mg/L)、次黄嘌呤(2mmol/L)、异双丁酰环腺苷酸(2mmol/L)、IGF-I(50μg/L)、氢化可的松(40μg/L)和ITS(50μg/L)的培养液中得以存活并生长。在二维培养体系中,卵泡在体外的生长模式和体内有很大差别。最显著的特征是卵泡不像在体内那样保持完整的立体结构一直到结束。绝大部分卵泡不同程度地发生基膜溶解和破裂,颗粒细胞向四周扩展并贴壁,形成单层。由于卵泡原有三维立体结构的破坏,易于导致卵母细胞的迁移。在生长方式上以数个卵泡聚集生长对其卵母细胞的生长似乎较为有利。卵泡卵母细胞在体外培养9d,其直径可达150μm以上,达到了成熟时体积,存活率为53%。实验证明,山羊无腔卵泡卵母细胞在合适的培养体系中,能在体外存活并生长,并能发育到成熟时的大小。

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