HPLC梯度洗脱法测定beagle犬血浆中阿魏酸钠的含量

摘要

目的:建立快速、灵敏、准确测定beagle犬血浆中阿魏酸钠含量的HPLC法.方法:采用HPLC梯度洗脱法进行测定.样品用乙醚萃取,以替硝唑为内标,采用Kromasil C-18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),药物/内标峰高比定量.流动相A泵为1%醋酸,B泵为乙腈,梯度设置:0～8.5 min为A:B=80:20,流速1.0 mL/min;8.5～11.5 min为A:B=0:100,流速1.2 mL/min;11.5～16 min恢复流动相条件A:B=80:20.检测波长320 nm.结果:与等度洗脱法相比,分析运行时间从40 min缩短至16 min.阿魏酸钠和内标分离良好,在标准曲线范围(0.05～10μg/mL)内线性关系良好(r=0.999 9),准确度、精密度、灵敏度均符合生物样品分析要求.结论:本方法灵敏、准确,适用于阿魏酸钠血药浓度的测定及药动学研究.