产冷适应复合酶菌株Pseudomonas sp.NJ197的选育、发酵条件及酶学性质

摘要

从南极普利兹湾深海沉积物中筛选到一株同时产多种冷适应酶的菌株NJ197，细菌学形态鉴定及16SrDNA序列分析表明，该菌株属于假单胞菌属（Pseudomonas）．生长特性研究表明，该菌株属于耐冷菌，其最适生长温度为5～15℃．NJ197菌株能利用多种单一的碳、氮源产酶，最适产酶温度为20℃，最高产酶温度为30℃．粗酶液经硫酸铵盐析、DEAE cellulose-52柱层析初步分离纯化后进行酶学性质的研究．该菌株所分泌复合酶中脂肪酶和淀粉酶的活力最高，它们的最适作用温度分别为30℃和35℃，最适pH值分别为9．0和9．5，对热敏感，是典型的碱性冷适应复合酶．Ca^2＋、Mn^2＋、Cu^2＋、Co^2＋、Fe^3＋对该复合酶有较为明显的激活作用，而Zn^2＋、Hg^2＋、Rb^2＋、Cd^2＋、EDTA则能抑制酶活．其中脂肪酶能在高浓度的SDS、CHAPS等变性剂中表现出较好的稳定性．