一种从RNA Blot杂交膜上脱除探针的改进方法

摘要

目的 :探讨脱除RNABlot膜上的杂交探针的方法 ,解决杂交中RNABlot膜重复使用的问题。方法 :经NBT BCIP化学显色的RNABlot杂交膜先用二甲基甲酰胺在 6 0℃处理 90min ,然后用脱探针溶液 (5 0 %去离子甲酰胺、5 0mmol LTris -HClpH7 5、5 %SDS)在 80℃处理 90min ,经过处理的膜再次用于下一轮的杂交。结果 :用这一改进的方法 ,可以完全脱除杂交膜上的地高辛标记的cDNA探针 ,RNABlot膜可以重复杂交 5轮以上 ,杂交带仍然保持清晰锐利。结论 :该改进方法操作简便 。