胰高血糖素样肽-1及其类似物EX-4促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖与成骨分化

摘要

目的：观察胰高血糖素样肽-1（GLP-1）及其受体激动剂exendin-4（EX-4）对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖与成骨分化的影响。方法：取大鼠股骨和胫骨全骨髓,采用贴壁法分离BMSCs并传代至第三代,培养2d后分成4组：BMSC组、诱导成骨组（osteoblast induced medium,OIM组）和诱导加药组,诱导加药组细分为GLP-1（10^-9~10^-7 mol/L）或EX-4（10^-9~10^-7 mol/L）的不同浓度组,MTT法检测细胞增殖能力;测定碱性磷酸酶（ALP）活性;通过ALP染色及茜素红染色观察药物诱导BMSCs向成骨细胞分化、矿化的效果;采用RT-PCR方法检测ALP和Runx2成骨相关基因的表达情况。结果：与诱导对照组相比,GLP-1及EX-4各浓度处理组呈剂量依赖性显著促进细胞增殖（P〈0.05）;ALP染色与茜素红染色结果显示,对照组无显色或显色不明显,而GLP-1及EX-4组均有阳性显色。GLP-1及EX-4可以显著提高ALP活性,并提高Runx2、ALP的表达水平。结论：GLP-1及EX-4不仅能够直接促进BMSCs增殖,并促进其向成骨细胞分化,GLP-1及EX-4可能在骨重建中发挥重要的作用。