不同培养方法对共培养体系中破骨细胞生成影响的研究

摘要

目的:研究不同培养方法对成骨细胞(OB)-破骨细胞(OC)共培养体系中破骨细胞生成的影响。方法:采用直接混合(比例1∶10)培养的方法建立OB-OC直接接触共培养体系,并观察培养基中加入10-6 mol/L PGE2和10-8 mol/L VitD3对破骨细胞生成的影响。应用聚酯微孔扩散膜隔断的双室24孔板间建立非直接接触OB-OC共培养体系。实验分2组:A组为直接接触法,B组为非直接接触法。2组培养基中均加入PGE2和VitD3。于培养第7、9天分别采用TRAP染色和牙本质磨片的扫描电镜(SEM)观察评价OC生成情况。结果:A、B组细胞均有TRAP阳性多核OC生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但A组所形成的OC数目及吸收陷窝显著多于B组。在直接法共培养体系中,PGE2和VitD3有效促进了OC生成。结论:直接接触和间接接触共培养法均可用于破骨细胞培养,而前者效果更好。在共培养中PGE2和VitD3可有效促进OC生成。