L-精氨酸对模拟缺血再灌注培养乳兔窦房结细胞损伤的影响

摘要

目的:观察模拟缺血再灌注(IR)培养乳兔窦房结细胞(SANC)损伤及左旋精氨酸(L-Arg)干预作用。方法:对SANC模拟低糖缺氧培养,添加L-Arg和L-Arg+L-NAME与培养细胞共同孵育,观察细胞形态变化。细胞分为7组:正常对照组;I120组;I120R120组;I120+L-Arg组;I120R120+L-Arg组;I120+L-Arg+L-NAME组;I120R120+L-Arg+L-NAME组。结果:I120组、I120+L-Arg+L-NAME组较多细胞核浓缩,胞质嗜酸性增强为紫红色;AO荧光染色示凋亡细胞体积明显缩小,核呈黄绿色,断裂为多个碎块状,碎裂的核由膜包裹着凸起于细胞表面呈黄绿色凋亡小体,与I120组、I120R120组比较,I120+L-Arg组、I120R120+L-Arg组凋亡率明显降低(P<0.05);而I120+L-Arg+L-NAME组和I120R120+L-Arg+L-NAME组无明显改善(P>0.05);电镜下,凋亡细胞核染色质固缩,聚集于核膜呈境界分明的块状或新月形小体,染色质凝聚于核周边;细胞核分解成大小不等的浓缩团块,游离于胞浆中。结论:①模拟缺血一定时间后可以诱导SANC凋亡,再灌注后细胞损伤加重;②NO底物L-精氨酸可减轻模拟缺血-再灌注窦房结细胞结构损伤。