大肠埃希菌植物毒素Gelonin核心功能区表达和纯化及抗肿瘤活性研究

摘要

目的:在大肠埃希菌中表达纯化植物毒素Gelonin核心功能区△Gel(S8-K200),并研究其抗肿瘤活性。方法:以pET30a(+)-Gelonin为模板,采用PCR方法扩增△Gel基因,克隆插入pEASY-B载体,测序鉴定后插入pET30a(+)载体,转化感受态细胞BL21(DE3)pLysS,诱导表达并纯化目的蛋白,并观察其抗肿瘤活性和细胞毒性。结果:△Gel(S8-K200)目的基因的大小约为600bp,SDS-PAGE电泳显示目的蛋白的大小约为27×103,体外实验结果显示,△Gel和Gelonin对肿瘤细胞系HL-60具有明显的杀伤作用,而对正常人胚肺细胞系WI-38毒性极小。结论:Ge-lonin核心功能区△Gel保持了Gelonin毒素蛋白全部的抗肿瘤活性,具有很好的开发前景。