炎症微环境下骨髓间充质干细胞骨向分化中Periostin基因表达研究

摘要

目的:探讨炎症微环境对Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)成骨分化Periostin基因表达的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离和培养rBMSCs,取第3代rBMSCs成骨、成脂分化诱导;10μg/L TNF-α作用于rBMSCs模拟炎症微环境,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,qRT-PCR检测IL-1β及TNF-α的基因表达。将第3代rBMSCs分成对照组(OM)、炎症组(OM+TNF-α)进行成骨诱导,茜素红染色及钙离子沉积量检测,在成骨诱导的第7、14天采用qRT-PCR检测细胞中Periostin和Runx2的基因表达水平,Western blot检测Periostin蛋白表达量。结果:全骨髓贴壁法成功分离培养rBMSCs;炎症组细胞TNF-α及IL-1β的基因表达水平分别是对照组的1.8倍(P<0.05)、2.1倍(P<0.01);炎症组较对照组成骨能力下降,相关成骨基因表达量降低;成骨诱导后炎症组的Periostin基因及蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论:炎症微环境下诱导rBMSCs成骨分化Periostin基因表达水平下降,且rBMSCs的成骨能力降低。