微应变环境下柚皮苷单体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

摘要

目的：探讨在微应变环境下,中药骨碎补萃取物-柚皮苷单体(Naringin)对体外培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响及机制.方法：将体外培养的兔MSCs接种于硅橡胶膜上,利用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱系统,对细胞进行周期性循环牵张微应变加载.实验分为A组:常规培养环境的空白对照组;B组:单纯5万微应变加载组;C组:单纯含柚皮苷的培养组,柚皮苷浓度分别为2ng/ml、20ng/ml和200ng/ml;D组:5万微应变环境下,联合应用含柚皮苷浓度为2ng/ml、20ng/ml和200ng/ml的培养组.应用流式细胞仪检测微应变加载后各组MSCs的增殖活性.RT-PCR检测各组细胞CON、Runx2及Col Ⅰ的基因表达.结果：5万微应变环境下联合柚皮苷培养的MSCs呈现明显的极性排列趋向,且细胞长轴平行力学刺激方向.柚皮苷与微应变刺激联合作用下,能够显著的提高MSCs的增殖活性;5万微应变刺激下200ng/ml的柚皮苷提高OCN基因表达,5万微应变刺激下不同浓度的柚皮苷均明显增强了Runx2基因的表达,且与柚皮苷浓度成正效应;微应变刺激下低浓度柚皮苷促进Col Ⅰ基因表达,而微应变刺激下高浓度柚皮苷,却抑制了Col Ⅰ基因的表达.结论：微应变环境与柚皮苷单体联合作用,增强了MSCs的增殖活性并能够促进其向成骨分化，为临床骨质疏松症的预防与治疗提供理论依据。