LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中4种CYP450探针药物浓度

摘要

目的:建立高效液相-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定大鼠血浆中非那西丁(1A2),甲苯磺丁脲(2C9),右美沙芬(2D6),咪达唑仑(3A4)4种探针底物浓度。方法:采用symmetry C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相为甲醇:0.1%甲酸水溶液(67∶33,V/V),流速为0.2 m L/min,柱温35℃。电喷雾离子化,检测方式为多反应离子监测。以卡马西平为内标,同时检测大鼠血浆中非那西丁、甲苯磺丁脲、右美沙芬、咪达唑仑的药物浓度,并进行其专属性、精密度、准确度、稳定性的验证。结果:非那西丁(10~5 000 ng/m L)、甲苯磺丁脲(20~10 000 ng/m L)、右美沙芬(4~1 000 ng/m L)、咪达唑仑(4~1 000 ng/m L)线性关系良好,R^2>0.99,准确度为95.6%~105.2%,日内和日间精密度RSD(%)<10%,提取回收率>77%,RSD(%)<7%、基质效应在90.7%~100.3%之间,RSD(%)<5.9%,稳定性好。结论:建立了同时快速测定大鼠血浆中4种探针药物(非那西丁、甲苯磺丁脲、右美沙芬、咪达唑仑)浓度的高效液相-串联质谱分析方法,准确度和灵敏度高,专属性强。血浆样品的稳定性好,适用于CYP450酶活性的研究。