bFGF诱导人胚视网膜色素上皮细胞转分化的研究

摘要

目的探讨bFGF体外诱导早期人胚视网膜色素上皮(RPE)细胞转分化现象及其分子机制,为视网膜发育的进一步基础研究和临床RPE细胞移植奠定基础。方法取4~6代人胚(6w^10w)RPE细胞,bFGF(20 ng/ml)诱导培养(4 d^6 d)后观察RPE细胞形态学的改变,用免疫细胞化学作转分化RPE细胞鉴定。RT-PCR分析转分化RPE细胞小眼畸形基因(MITF)的表达。结果bFGF诱导培养后的人胚RPE细胞呈现类神经样细胞表型,不仅表达自身上皮细胞标记物角蛋白(Keratin),同时还表达多种神经视网膜上皮细胞标记物(MAP2、GS、GFAP、Peripherin、Opsin,但不表达NCAM);用RT-PCR方法没有检测到转分化RPE细胞MITF-A mRNA表达。结论早期人胚RPE细胞的发育具有一定的可塑性,bFGF可以诱导早期人胚RPE细胞表达多种神经视网膜上皮细胞标记物,可能是通过抑制MITF-A的分子信号通路。